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布鲁氏菌检测试剂盒测量原理和流程分别是怎样的?

 更新时间:2022-12-15 点击量:455
  布鲁氏菌病是一种亚急性或慢性的疾病,可造成多种动物发病,本质上是一种动物疾病,特别是家畜易发病,由布鲁氏菌属的细菌引起发病,人类可作为宿主偶尔携带这类细菌。偏好与人畜共患病潜能特征有差异的细菌,主要为:羊布鲁氏菌,猪布鲁氏菌,流产布鲁氏菌和犬布鲁氏菌。
  布鲁氏菌检测试剂盒利用实时荧光PCR原理,主要用于布鲁氏菌的定性筛查检测。检测原理如下:
  以基因工程表达布鲁氏菌蛋白作检测和捕获抗原,采用“双抗原夹心法”胶体金免疫技术设计,标记胶体金的抗原与样本中特异性抗体形成复合物,复合物在NC膜爬行的过程中与被包被在检测线上的抗原特异性结合而被固定和富集于检测线,使检测线显红色反应,以试剂检测线显色与否反应来判断样品是否存在布鲁氏菌抗体。
  布鲁氏菌检测试剂盒操作步骤:
  1.从试剂盒中分别取出荧光反应液、阴性对照、阳性对照。
  2.在室温下溶解后,充分震荡混匀,瞬时离心。
  3.取出PCR八连管,放在PCR板上。
  4.在PCR八连管内分装荧光反应液,分别向多个PCR管中加入提取好的样品核酸,其余两个管内分别加入阴性对照和阳性对照。完成后盖上管盖,并在右上角做好标记。
  5.将标记好的PCR八连管放入仪器震荡混匀后瞬时离心,取出后拿起观察有无气泡。
  6.打开荧光定量PCR仪器,将PCR八连管放入卡槽中,盖上仪器。
  7.点击实验程序,选择新建实验,点击运行程序,并按照PCR八连管标记顺序依次选择孔位信息:待测样本、阳性对照、阴性对照。
  8.点击开始按钮,运行实验。
  9.实验完成后,在屏幕查看实验结果,点击详细数据可查看实验数据,进行数据回顾。