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大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒

描述:大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒操作簡單、結果精確,臻科生物從業多年一直專心致力于免疫學技術的積累與發展,以其優質的產品質量與專業的技術服務,贏得業內廣大人士的認可。我司也一直和國內外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關系,共同努力合作共贏。

更新時間:2024-07-03
產品型號:
廠商性質:生產廠家
詳情介紹

一、大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒詳細介紹

中文名稱:大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:大鼠ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷。

保存及有效期:2-8℃,六個月

檢測樣本種類:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

臻科生物供應的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等

二、實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)水平。用純化的大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1),再與HRP 標記的Ⅰ型膠原α1(COL1α1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅰ型膠原α1(COL1α1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)濃度。

三、試劑盒組成

1

30 倍濃縮洗滌液

20ml×1 瓶

7

終止液

6ml×1 瓶

2

酶標試劑

6ml×1 瓶

8

標準品(240 pmol/L)

0.5ml×1 瓶

3

酶標包被板

12 孔×8 條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1 瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1 瓶

10

說明書

1 份

5

顯色劑A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 張

6

顯色劑 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 個

 

 

四、操作步驟

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

五、試劑盒計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的

OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,

即為樣品的實際濃度。

 

六、注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值

大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計

算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

 

七.特別提醒

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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