(1)进锅不挤压：摆放待灭菌的菌种袋必须分层，每层菌种袋不行摆太挤，要留一定空地，不能彼此挤压。不适宜将菌种袋卧叠，要分层立放，以确保蒸汽畅流和接种穴无缺。为了防止棉塞易潮湿，可在棉塞上盖一层薄膜或油纸，但掩盖物不行太大，否则会影响上基层蒸汽畅流;也可将4个菌种袋的棉塞并拢，棉塞向下一同塞到4个菌种袋的空地中，这样塑料袋标准要加长，但防潮作用杰出。
(2)及时灭菌：随装随灭。配料到灭菌间隔时间越短越好，防止杂菌自繁。大规模出产时，要分锅灭菌。
(3)攻头：指开端灭菌时要大火猛烧。从开端灭菌到温度达100℃，历时越短越好，不能超过2小时，防止长时间高温高湿造成杂菌自繁。当然，要做到这一点还取决于灭菌锅的保温保气功能。
(4)控中心：指锅体下部温度到达100~C后，控制火势烧稳火，保持8～10小时。此间，温度不行回落，灭菌操作者要坚守岗位，不能因通宵灭菌、疲惫或其他原因此松懈，引起温度回落。另外，常压灭菌为了防止烧干应留意及时向蒸发锅内补充水，但补水不能造成锅内水中止沸腾，可考虑补充沸水或微量接连补水。可见，要想节省燃料，又要做到上述这些，建造一个保温、保汽功能杰出的灭菌锅十分重要。
(5)保尾：指灭菌完毕前要再一次大火猛烧。目的在于加大蒸汽量，灭菌完毕后翻开柜门时有大量蒸汽冒出，带走棉塞湿气。但此时要将连体灭菌锅中蒸发锅内的水排干。在开门时先将门拉开一条缝隙散气，烘干棉塞，防止冷热触摸产生冷凝水使棉塞受潮。
